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QIAGEN Ni-NTA Agarose現(xiàn)貨30210/30230/30250

  • 更新時(shí)間:  2023-07-26
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  • QIAGEN Ni-NTA Agarose現(xiàn)貨30210/30230/30250
    利用重力流層析純化His-tagged蛋白
    一步純化就可從細(xì)胞裂解液中得到純度大于95%的蛋白
    高親和力和高結(jié)合能力
    可以選擇在天然或變性條件下純化蛋白
    預(yù)先加載的即用型基質(zhì)適合任何規(guī)模的蛋白純化
    提供自動(dòng)純化和檢測(cè)的方法
詳細(xì)介紹

QIAGEN Ni-NTA Agarose現(xiàn)貨30210/30230/30250

A Agarose是親合層析用基質(zhì),用于純化帶有His標(biāo)簽的重組蛋白。His標(biāo)簽上的組氨酸殘基能高特異性的結(jié)合到固定的鎳離子上。細(xì)胞裂解上清液上樣到純化基質(zhì)上,His-tagged蛋白結(jié)合,其他蛋白則流過(guò)基質(zhì)。洗滌后,His-tagged蛋白可在天然或變性條件下洗脫。

QIAGEN Ni-NTA Agarose現(xiàn)貨30210/30230/30250

Ni-NTA Agarose是親合層析用基質(zhì),用于純化帶有His標(biāo)簽的重組蛋白。His標(biāo)簽上的組氨酸殘基能高特異性的結(jié)合到固定的鎳離子上。細(xì)胞裂解上清液上樣到純化基質(zhì)上,His-tagged蛋白結(jié)合,其他蛋白則流過(guò)基質(zhì)。洗滌后,His-tagged蛋白可在天然或變性條件下洗脫。

 

  • 蛋白質(zhì)
  • Crystallization2
  • 蛋白制備39
  • 蛋白穩(wěn)定3
  • 蛋白結(jié)晶9
  • 蛋白表達(dá)8

Ni-NTA Agarose

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利用重力流層析純化His-tagged蛋白

  • 一步純化就可從細(xì)胞裂解液中得到純度大于95%的蛋白
  • 高親和力和高結(jié)合能力
  • 可以選擇在天然或變性條件下純化蛋白
  • 預(yù)先加載的即用型基質(zhì)適合任何規(guī)模的蛋白純化
  • 提供自動(dòng)純化和檢測(cè)的方法

Ni-NTA Agarose是親合層析用基質(zhì),用于純化帶有His標(biāo)簽的重組蛋白。His標(biāo)簽上的組氨酸殘基能高特異性的結(jié)合到固定的鎳離子上。細(xì)胞裂解上清液上樣到純化基質(zhì)上,His-tagged蛋白結(jié)合,其他蛋白則流過(guò)基質(zhì)。洗滌后,His-tagged蛋白可在天然或變性條件下洗脫。

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  • 使用Ni-NTA蛋白純化產(chǎn)品純化蛋白質(zhì)。

  • 在天然條件下一步純化蛋白。

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在天然條件下一步純化蛋白。

在天然條件下純化蛋白。人血清應(yīng)答因子(SRF)在帶有牛痘病毒載體的HeLa細(xì)胞中表達(dá),使用Ni-NTA Agarose以及在洗滌和洗脫步驟中不同濃度的咪唑純化。銀染法使得蛋白可見(jiàn)。CL:細(xì)胞裂解物;FT:流過(guò)部分;W1: 0.8 mM洗滌液;W2 & W3: 8 mM 洗滌液;W4 & W5: 40 mM 洗滌液;E1 & E2: 80 mM 洗脫液。(數(shù)據(jù)由德國(guó)H. Stunnenberg, EMBL, Heidelberg提供。)

Performance

Ni-NTA Agarose中的Ni-NTA與Sepharose CL-6B support偶聯(lián),具有強(qiáng)結(jié)合能力,非特異性結(jié)合少(參見(jiàn)"One-step purification under native conditions")。這種材料對(duì)于多數(shù)的生產(chǎn)規(guī)模和柱純化具有的可操作性。Ni-NTA Agarose可單獨(dú)訂購(gòu),也包含在QIAexpress Kits中。QIAexpress Kits是適用于大腸桿菌His-tagged蛋白高效表達(dá)和純化的完整試劑盒。

Principle

QIAexpress Ni-NTA Protein Purification System基于獲得的Ni-NTA(氨基三乙酸鎳)樹(shù)脂,對(duì)含有6個(gè)或以上組氨酸殘基(連續(xù)或交替)親合標(biāo)簽的蛋白選擇能力強(qiáng)。該技術(shù)可在天然或變性條件下,從所有表達(dá)體系中一步純化幾乎所有的His-tagged蛋白。NTA含有四個(gè)鎳離子螯合位點(diǎn),與鎳的結(jié)合能力比其他僅有三個(gè)金屬螯合位點(diǎn)的金屬螯合純化方法的結(jié)合能力強(qiáng)。多出的一個(gè)螯合位點(diǎn)可防止鎳離子脫落,因此具有更強(qiáng)的結(jié)合能力,蛋白純度比金屬螯合純化方法的蛋白純度高。QIAexpress技術(shù)可用于從桿狀病毒、哺乳動(dòng)物細(xì)胞、酵母和細(xì)菌等各種表達(dá)體系中純化His-tagged蛋白。

Procedure

His-tagged蛋白的純化包括四個(gè)步驟:裂解、結(jié)合、洗滌和洗脫(參見(jiàn)Protein purification with the Ni-NTA protein purification system)。使用QIAexpress 技術(shù)純化重組蛋白無(wú)需依賴于蛋白的三維結(jié)構(gòu)或6xHis標(biāo)簽。因此可實(shí)現(xiàn)在天然或變性條件下,從稀釋溶液或細(xì)胞裂解液中一步純化蛋白??墒褂脧?qiáng)變性劑和洗滌劑高效溶解和純化受體、膜蛋白和形成包涵體的蛋白。洗滌緩沖液中可包含有能高效去除非特異性結(jié)合產(chǎn)物的試劑(見(jiàn)表)。在溫和條件下加入100–250 mM咪唑作為競(jìng)爭(zhēng)性洗脫試劑或降低pH值,可洗脫得到純化蛋白。


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